Actividad proteolítica y elastásica de Pseudomonas aeruginosa / Study of the enzymatic activity of 20 strains of Pseudomonas aeruginosa

Se estudia la capacidad productora de proteasas extracelulares de cepas de Pseudomonas aeruginosa, usándose como sustrato gelatina, caseína y elastina. Se usan tres medios de cultivo de distinta complejidad y contenido proteico para medir dicha actividad: a) medio base mineral constituído por sales y extracto de levadura; b) medio dializante, formado por pequeños péptidos que atraviesan el saco de diálisis, provenientes de caldo-cerebro-corazón más glucosa 50 mM y c) medio complejo constituído por caldo-cerebro-corazón. Se selecciona éste último por ser el mejor productor de las enzimas. La purificación de las mismas se efectuó por precipitación con sulfato de amonio al 60% y filtración molecular por Sephadex G - 100. El número de enzimas que actuaron sobre caseína se determinó por zimograma, previa separación en geles de poliacrilamida, número que se corroboró por cromatografía en Sephadex. Las 20 cepas estudiadas se seleccionaron por licuar la gelatina. Todas actuaron sobre caseína y el 80% degradó la elastina. El 25% de las cepas mostraron la presencia por zimograma, de dos formas moleculares; el resto una sola. El número de éstas fue independiente del medio de cultivo empleado, ya que dicho porcentaje se obtuvo trabajando con un mismo medio. Tampoco se encontró dependencia con el origen del material del cual se aisló la cepa. Las cepas recién aisladas fueron buenas productoras de enzimas proteolíticas, no así las mantenidas en el laboratorio. La actividad enzimática se fue perdiendo con el envejecimiento de las cepas, desapareciendo también las formas moleculares menos activas reveladas por el zimograma. La tinción de los geles de poliacrilamida reveló la presencia de polipéptidos, no así de lipo-y glicoproteínas

Propagacion del virus Pixuna en cultivos de embrion de raton. / Replication of Pixuna virus in mice embryo cells culture

Se estudio el comportamiento de cultivos de embrion de raton albino suizo, entre 11 y 18 dias de gestacion. infectados con el virus Pixuna. El cultivo de embrion de 11 dias resulto permisivo, dando una infeccion productiva y citocidica; el de 12 dias no mostro un efecto citopatico claro, y entre los 13 y los 18 dias, los cultivos resultaron ser permisivos, con una infeccion produtiva pero no citocidica. Se encontro que la fase de eclipse para el virus Pixuna en cultivo de embriones de 11 dias, estuvo entre los 15 y 90 min posteriores a la hora de adsorcion. La D-glucosamina no afecto el titulo infectivo del virus, usando embriones de 11 dias de edad como cultivo

Fracciones de cerebro de raton que inhiben inespecificamente la hemaglutinacion de algunos togavirus. / Mouse brain fractions of mice inhibiting inespecifically the hemagglutination of some togairridae

Se estudiaron fracciones obtenidas de cerebro de raton albino suizo de 10 dias de edad desde el punto de vista fisico, quimico y biologico. Se confirmo su constitucion predominantemente proteica; cuando la alfa-quimotripsina actua sobre ellas por un lapso de 120 segundos, se liberan aminoacidos y/o pequenos peptidos, perdiendose la propiedad biologica de inhibir la hemaglutinacion del virus de la encefalitis equina del este. Se demostro que la fraccion biologicamente activa contiene glico y lipoproteinas. El tratamiento con SDA destruyo las lipotroteinas y expuso grupos glicoproteicos. Las fracciones calentadas evidenciaron mas grupos neuraminicos, que reaccionan con la o-fenantrolina, absorbiendo mas al UV. Se comprobo la presencia de lipidos neutros que no fueron identificados. El punto isoionico dio un valor de 4,16 +/- 0,17, indicativo de la presencia de grupos acidos